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文章來(lái)源:科學報

近日,華中農業大(dà)學作物遺傳改良國(guó)家重點實驗室作物表型團隊教授楊萬能課題組研發了(le/liǎo)一(yī / yì /yí)種葉片氣孔表型測量新技術,并對不(bù)同玉米材料幹旱脅迫下的(de)氣孔性狀差異及其潛在(zài)應用價值進行了(le/liǎo)深入研究,爲(wéi / wèi)解決作物葉片氣孔表型高通量檢測和(hé / huò)遺傳機制解析提供技術支撐。該成果發表于(yú)《植物生物技術雜志》(Plant Biotechnology Journal)。《StomataScorer: A portable and high-throughput leaf stomata trait scorer combined with deep learning and an improved CV model》(X​iuying Liang,Xichen Xu,Zhiwei Wang,Lei He,Kaiqi Zhang,Bo Liang,Junli Ye,Jiawei Shi,Xi Wu,Mingqiu Dai,Wanneng Yang) doi:10.1111/pbi.13741

葉片氣孔表型提取和(hé / huò)分析流程

葉片氣孔運動是(shì)一(yī / yì /yí)個(gè)複雜的(de)調控過程,受到(dào)植物内外部多重因素的(de)影響,目前大(dà)部分的(de)葉片氣孔研究手段爲(wéi / wèi)有損檢測,尚沒有一(yī / yì /yí)套成熟的(de)活體葉片氣孔研究體系。

該研究利用兩種不(bù)同分辨率的(de)便攜式顯微成像儀獲取玉米活體葉片氣孔顯微圖像。帶有40倍鏡頭的(de)TipScope被用來(lái)提取低分辨率的(de)氣孔圖像,研發FPN深度學習模型提取和(hé / huò)分析氣孔數量和(hé / huò)氣孔密度;基于(yú)帶有400倍鏡頭的(de)ProScope HR2被用來(lái)提取的(de)高分辨率氣孔圖像,研發RCNN模型區分打開氣孔和(hé / huò)閉合氣孔,并計算開閉氣孔數量。

實驗結果表明,和(hé / huò)真實值比較,該技術氣孔表型檢測精度在(zài)0.85-0.99,平均相對誤差在(zài)0.02%-6.34%之(zhī)間,證明該技術檢測的(de)準确性。

在(zài)檢測效率方面,該技術無需對樣本進行預處理,處理500張TipScope圖像耗時(shí)約42秒,ProScope HR2獲取一(yī / yì /yí)幅圖像的(de)時(shí)間約爲(wéi / wèi)5~10s,處理500張ProScope圖像耗時(shí)約40分鍾。總體來(lái)說(shuō),提取每個(gè)葉片所有氣孔特征的(de)總時(shí)間約爲(wéi / wèi)10~15s。

爲(wéi / wèi)了(le/liǎo)驗證該方法提取的(de)氣孔性狀的(de)有效性,團隊進一(yī / yì /yí)步探索了(le/liǎo)B73玉米野生型和(hé / huò)Zmfab1a突變體在(zài)正常澆水和(hé / huò)幹旱脅迫條件下的(de)氣孔表型差異。研究表明,在(zài)幹旱複水後,Zmfab1a的(de)氣孔打開數量和(hé / huò)氣孔平均面積均高于(yú)B73,說(shuō)明突變體Zmfab1a葉片氣孔幹旱響應和(hé / huò)恢複能力高于(yú)B73,具有更好的(de)抗旱性。

爲(wéi / wèi)了(le/liǎo)進一(yī / yì /yí)步評估該氣孔分割方法的(de)可行性,研究還測試小麥、水稻、油菜、莴苣、煙草、馬鈴薯、蠶豆、棉花和(hé / huò)大(dà)豆其他(tā)9種植物,實驗結果表明該技術可以(yǐ)成功推廣到(dào)其他(tā)作物葉片氣孔表型檢測。

​綜上(shàng)所述,該研究提出(chū)了(le/liǎo)一(yī / yì /yí)種便攜式、低成本、高通量(約15秒/葉片)的(de)葉片氣孔表型動态提取和(hé / huò)分析方法,并建立門戶網站供全球用戶開放使用,該網站有可能能促進未來(lái)大(dà)群體作物葉片氣孔表型動态研究和(hé / huò)遺傳機制解析。

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